Departamento de biología molecular
Descripción
Se pretende determinar el grado de cumplimiento de la Directiva 2001/18/CE de 12 de Marzo 2001 sobre la liberación internacional en el medio ambiente de organismos modificados genéticamente. Determinación de variedades aprobadas por la Unión Europea. Veificación de los Reglamentos 1829/2003 sobre alimentos y piensos modificados genéticamente y 1830/2003 sobre trazabilidad y etiquetado de OMG´S.
La identificación genómica se basa en la extracción de ADN de la muestra, su amplificación mediante la técnica de PCR, verificación de los productos amplificados y comparaciñon de la secuencia de ADN frente a otras secuencias.
Instrumental
Microcentrífuga de 13000 g, micropipetas de distintos volúmenes, lector ELISA, fuente de electroforesis, sistema completo de electroforesis para geles de agarosa, termociclador Gene Amp PCR System 2700 de Appilied Biosystem, Sistema de revelado y visionado de geles Digigenius de Syngene con software diseñado a tal fin.
Parámetros
Determinación de transgénicos, tanto cualitativo como cuantitativo, Identificación de especies, patógenos.
Analisis de patógenos por PCR
Detección de microorganismos patógenos en alimentación humana y animal mediante técnicas de Biología molecular por análisis del ADN mediante la reacción de la polimerasa (PCR). Los microorganismos a analizar se tratan de Salmonella, Listeria, Legionella spp y Legionella pneumofila, entre otros.
En control de calidad industrial, este metodo analítico nos ofrece dos ventajas considerables:
a) Rapidez: El analisis por PCR detectando el ADN del microoganismo, se puede realizar en 24 h sin hacer falta confirmación posterior, con lo cual puede ser el sistema para que la producción de las empresas agroalimentarias salga al mercado con la garantía de tener el resultado y el aval del control de patógenos y así con ello dar mayor garantia al
consumidor.
b) Sensibilidad: Al tratarse de un analisis de ADN del microorganismo los limites de detección se ven considerablemente disminuidos, como por ejemplo en el analisis de Legionella se pueden detectar 2 bacterias en un fondo bacteriano de 20 millones de bacterias Gram+.
Este servicio de Identificación genómica se basa en la extracción de ADN de la muestra, su amplificación mediante la técnica de PCR, verificación de los productos amplificados y comparación de la secuencia de ADN frente a otras secuencias.
Con todo ello nuestro departamento de Biología molecular les asesorará para el cumplimiento de la legislación nacional y comunitaria en control de microorganismos patógenos.
Analisis de identificacion de especies con la siguiente documentacion:
Identificación y autentificación de especies o razas en productos cárnicos, pescados, piensos y sus materias primas en alimentación humana y animal mediante técnicas de Biología molecular por análisis del ADN mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR).
En el caso de productos de la pesca la legislación actual obliga a la identificación en el etiquetado de la especie a la que pertenece el producto, tanto en alimentos frescos como congelados.
La clasificación de especies de Gádidos en pescados procesados es muy importante por el valor comercial de cada especie, por ello conocer si se trata de bacalao del atlántico: Gadus morhua ó Gadus macrocefalus es muy importante comercialmente y legalmente. También especies de Atún y bonito que por la gran cantidad de especies de Túnidos como pueden ser: Thunnus obesus , Tunnus alalunga,..
En productos cárnicos ofrecemos servicios de autentificación de especies como pueden ser: Pollo Gallus gallus, Vaca Bos taurus, Cerdo Sus scrofa, Oveja Ovis ovis, Cabra Capra hircus, Conejo Oryctolagus caniculus Con ello se pueden confirmar la presencia en derivados cárnicos de determinadas especies y con ello poder saber los requerimientos técnicos de fabricación, legales de composición e incluso religiosos (los musulmanes no pueden comen carne de cerdo).
En piensos y sus materias primas es muy importante el conocer la existencia de especies tales como harinas de carne en piensos acabados, presencia de determinadas especies en piensos de animales que van luego al consumo humano, como por ejemplo el problema del mal de las vacas locas.
Con todo ello nuestro departamento de Biología molecular les asesorará para el cumplimiento de la legislación nacional y comunitaria en identificación y autentificación de especies.
Análisis
Análisis cualitativos, semicuantitativo y cuantitativo de material transgénico en alimentos por la determinación de organismos genéticamente modificados-OGM¨S, Identificación de especies, patógenos.
Análisis cualitativo para la detección de OGM’S en muestras con contenido vegetal mediante la técnica de identificación genética del ADN por la Reacción de Cadena de la olimerasa (PCR).
Metodología:
Se efectúa un extracción del ADN de la muestra y se amplifican los ácidos nucleicos mediante termociclador Gene Amp PCR System 2700 de Appilied Biosystem. De ese modo se detecta la aparición de bandas específicas del gen promotor 35S y terminador NOS, distinguibles por su tamaño molecular y diferenciables por geles de agarosa, mediante la técnica de electroforesis. Posteriormente se efectúa un revelado y visionado digital de un equipo Digigenius de Syngene, y así como ello se detecta la presencia de OGM’S en la muestra analizada.
Los controles incluidos en la determinación de OGM’S son:
– Muestra por duplicado.
– Positivos:
a) de amplificación de un gen genético del maíz o soja sobre la muestra.
b) de amplificación de un OGM de maíz o soja.
– Negativos:
a) de extracción
b) de la reacción de PCR por ampliación de OGM’S sobre ADN no transgénico.
c) de la reacción de PCR por amplificación de OGM’S sin ADN presente.
d) de CaMV RT para evitar falsos positivos por contaminación de ese virus.
El resultado quedará registrado como Ausencia/ Presencia de material transgénico.
Análisis cuantitativo para la detección de Roundup Ready en muestra con contenido vegetal mediante la técnica de identificación genética del ADN por la Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR).
Metodología:
Se efectúa una extracción del ADN de la muestra y se amplifican los ácidos nucleicos por duplicado utilizando sondas Taq Man en un termociclador a tiempo real y con ello detectar la cantidad de soja transgénica Roundup Ready respecto a la soja total de la muestra analizada.
Los controles incluidos en la determinación de OGM’S son:
– Muestras por duplicado.
– Positivos:
a) de amplificación de un gen genérico del maíz o soja sobre al muestra
b) de amplificación de un OGM de maíz soja.
c) Curva de calibrado utilizando materiales de referencia certificados CEE de Soja Roundup Ready (0.1%, 0.5%, 1%, 5%)
– Negativos:
a) de extracción
b) de la reacción de PCR por ampliación de OGM’S sobre ADN no transgénico.
c) de la reacción de PCR por amplificación de OGM’S sin ADN presente.
d) de CaMV RT para evitar falsos positivos por Hoja 20 Identificación de patogenos
